Électrophysiologie
L’électrophysiologie fait partie de la voie d’apprentissage du Nanopore Wiki. L’électrophysiologie fournit le cadre de mesure électrique à faible bruit utilisé dans de nombreux expériences sur les nanopores à pore unique.
Concepts fondamentaux
- Un capteur de tension (voltage clamp) permet de maintenir la tension transmembranaire pendant la mesure du courant.
- Les enregistrements sur un seul canal nécessitent des membranes stables, des électrodes propres, une protection contre les perturbations électromagnétiques, ainsi que des amplificateurs à faible bruit.
- Les traces actuelles contiennent le courant de base, les signaux d'événement, les composantes de dérive et les composantes de bruit.
- Les métadonnées telles que la tension, la bande passante, le taux d'échantillonnage, la température et le tampon doivent être enregistrées.
Processus de mesure
| Étape | Description |
|---|---|
| 1 | Préparez la chambre, les électrodes, le tampon et le blindage. |
| 2 | Formuler ou vérifier un système de pores soutenu par une membrane ou une puce. |
| 3 | Mesurez le bruit de base (baseline noise) ainsi que le bruit RMS (Root Mean Square) avant d'ajouter l'échantillon. |
| 4 | Enregistrer les événements et annoter les changements de tension, l'ajout d'échantillons et l'état des pores. |
Applications typiques
- Enregistrements de nanopores biologiques.
- Détection mono-canal et ingénierie des pores.
- Contrôle de qualité avant la détection de l'événement.
Pièges courants
- Ignorer les déplacements des électrodes et les artefacts liés au système de mise à la terre.
- Échec à distinguer la rupture de la membrane, l’insertion des pores et les événements liés aux échantillons.
- Afficher des traces sans paramètres d’acquisition.